实验导读

酷夏来临,透心凉,心飞扬;见证激情时刻;橙心橙意,完美现榨的各色饮料成为大家清凉夏季冰爽到底的首选。为了吸迎合消费者的购买喜好,众多商家会通过添加色素的手段使得饮料色泽更美丽。相较于食用天然色素,合成着色剂因着色能力强、色泽鲜艳、不易褪色、稳定性好、易溶解、易调色、成本低等优势,成为臻选。

据研究,食用合成色素对人体的毒性作用可能有三方面,即一般毒性、致泻性与致癌性,特别是致癌性更为人们所关注。此外,许多食用合成色素在生产过程中还可能混入砷和铅,色素中还可能混入一些有毒的中间产物。饮料中常见的合成色素有柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝等。 HPLC法作为分析方法,对饮料中的合成色素进行了提取检测,该方法可简化样品的前处理过程,节省有机溶剂的使用,操作简便。本次实验使用的是Copure®合成色素专用柱。

一、样品提取

称取已均质样品10.0 g,装入50 mL离心管中,加入10 mL乙醇/氨水溶液涡旋1min,4000r/min离心5 min,重复提取至提取液无色,合并上清液置于80℃水浴中浓缩至2 mL,水洗转移至15 mL离心管中,用水定容(若试样pH偏高,用柠檬酸水溶液调节pH至6左右)

二、SPE柱净化(合成色素专用柱,150 mg/6 mL)

(1)活化:合成色素专用柱使用前用6 mL甲醇,6 mL水活化。

(2)上样和洗脱:取待净化液加入固相萃取柱中,弃去流出液;依次用6 mL水、6 mL甲醇-甲酸(6:4)、6 mL水淋洗;通入空气吹干小柱5 min,6 mL 2%氨化甲醇洗脱并接收。

(3)重新溶解:收集液于50℃氮气吹干,用1 mL水定容,过0.45 μm水系滤器过滤,供上机测试。

三、仪器条件

仪  器:Waters Alliance2695

色谱柱:CommaSil® ODS(4.6mm×250 mm, 5 μm)

检测器:Waters 2487紫外检测器

流动相:A:甲醇   B:0.02 mol/L乙酸铵缓冲液

洗脱方式:梯度洗脱

表1 梯度洗脱条件

流速:1.0 mL/min

检测波长:254 nm,509 nm

进样体积:10 μL

四、实验结果

表2  0.5 mg/kg饮料中的合成着色剂的添加回收结果
顶都
1柠檬黄:5.863 min 2苋菜红:6.182 min 3胭脂红:6.927 min 4日落黄:7.833 min 5诱惑红:8.683
6亮蓝:10.500 min
图1. 添加水平为0.5 mg/kg饮料中的合成着色剂的色谱图

订购信息如下(预购从速):

货号描述包装
COWAX6150-2150 mg/6 mL30支/盒
SF130-45-PTFE-HL亲水PTFE针式滤器,直径130mm,孔径0.45um,水系100个/盒
V2-AL2 mL棕色样品瓶,带书写,9-425100个/盒
SC2-52 mL样品瓶盖,预开口,9-425100个/盒
CS462605CommaSil® ODS柱,4.6mm x 250mm, 5um1根/盒

关于逗点

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