盐酸小檗碱介绍

盐酸小檗碱又称黄连素,是一种重要的生物碱,可从黄连、黄柏、三颗针等植物中提取。它对多种细菌如痢疾杆菌、结核杆菌、肺炎球菌、伤寒杆菌及白喉杆菌等都有抑制作用,其中对痢疾杆菌作用最强,常用来治疗细菌性胃肠炎、痢疾等消化道疾病。临床主要用于治疗细菌性痢疾和肠胃炎。

逗点生物开发出使用固相萃取法检测黄连中盐酸小檗碱,回收率101.7 %,RSD 0.9 %,为客户提供关于盐酸小檗碱检测有效的解决方案。

一、实验目的

本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法,HPLC法作为分析方法,检测黄连中盐酸小檗碱的含量。该方法可简化样品的前处理过程,节省有机溶剂的使用,操作简便。

二、实验目标物

盐酸小檗碱(CAS:141433-60-5)。

三、应用范围

本方法适用于黄连中盐酸小檗碱检测的HPLC检测及确证。

四、实验材料

biocomma® Copure® HLB 60 mg/3 mL(Cat. No. COHLB360)。

五、实验方法

1、样品提取
准确称取黄连0.5 g,加入25 mL水,加热煮沸10 min(防止烧干),冷却至室温过滤;再25 mL水淋洗提取物,最后定容至50 mL;取5 mL用水稀释至50 mL,取5 mL备用。

2、SPE净化
(1)活化:HLB固相萃取柱使用前依次用3 mL甲醇、3 mL 水活化。
(2)上样和洗脱:往固相萃取柱中加入备用提取液,弃去流出液;加入3 mL 15 %甲醇水溶液淋洗,弃去淋洗液,抽干小柱;再用3 mL甲醇溶液洗脱,收集洗脱液(整个上样、洗脱过程流速控制在1 mL/ min内)。
(3)重新溶解:洗脱液于50 ℃下氮吹至近干,用甲醇定容至1 mL,涡旋1 min,过滤供HPLC测试。

3、HPLC条件
设备:Waters Alliance 2695
色谱柱:InertSustain-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器:Waters 2487 紫外检测器
检测波长:298 nm
梯度洗脱:A:甲醇 B:0.1 %甲酸水
表1 梯度洗脱条件

流速:1.0 mL/min
进样体积:20 μL

七、实验结果

1、20.0 mg/kg黄连中盐酸小檗碱的添加回收结果
重庆彩票网 表2 20.0 mg/kg黄连中盐酸小檗碱的添加回收结果


2、添加水平为20.0 mg/kg盐酸小檗碱标准液相色谱图


图1 添加水平为20.0 mg/kg盐酸小檗碱标准液相色谱图

结论:本方法平均回收率为101.7 %,RSD为0.9 %,满足标准要求。

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